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1 范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化妝品中曲酸的液相色譜檢測方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于化妝品中曲酸的檢測。

2 原理

化妝品中的曲酸用水提取，過濾后，采用反相高效液相色譜技術(shù)進(jìn)行分離、測定。根據(jù)其保留時間定性，標(biāo)準(zhǔn)工作曲線法定量

3 試劑和材料

除非另有說明，所用試劑均為分析純，水為二次去離子水。

3.1 甲醇：色譜純。

3.2 磷酸二氫鉀：0.02mol/L

3.3 曲酸：純度≥99%；

3.4 曲酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液(200mg/L)：稱取0.02g曲酸，*到0.1mg，于50mL燒杯中，加適量水溶解，溶液定量移入100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。

4 儀器

4.1 液相色譜儀，配有紫外檢測器。

4.2 微量進(jìn)樣器，10L。

4.3 超聲波清洗器

4.4 離心機(jī)，12000r/min。

4.5 溶劑過濾器和0.45m過濾膜。

5 測定步驟

5.1 試樣的處理

稱取化妝品試樣約0.5g，*到1mg，于50mL具塞錐形瓶中，加入20mL水，在超聲波清洗器中超聲震蕩20min，將溶液移人50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。取部分溶液放入離心管中，在離心機(jī)上于12000r/min離心10min，離心后的上清液經(jīng)0.45m濾膜過濾，濾液待測定用。

5.2 測定

5.2.1 色譜條件

5.2.1.1 色譜柱：ODsC8柱[250mm×4.6mm(內(nèi)徑)，5m，或相當(dāng)者]。

5.2.1.2 流動相：甲醇：0.02mol/L磷酸二氫鉀=18：82(體積分?jǐn)?shù))。

5.2.1.3 流速：1.0mL/min；

5.2.1.4 檢測波長：273mm；

5.2.1.5 柱溫：室溫；

5.2.1.6 進(jìn)樣量：10μL。

5.2.2 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制

準(zhǔn)確移取曲酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.20mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL到系列10mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。取10μL溶液注入液相色譜儀進(jìn)行測定，以色譜峰的峰面積為縱坐標(biāo)，與其對應(yīng)的濃度為橫坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖參見附錄A。

5.2.3 試樣的測定

用微量進(jìn)樣器準(zhǔn)確吸取10μL試樣溶液(5.1)注入液相色譜儀進(jìn)行測定，記錄色譜峰的保留時間和峰面積。以其保留時間定性，峰面積定量。曲酸含量高的試樣可取適當(dāng)試樣溶液用水稀釋后進(jìn)行測定。

6 結(jié)果計算

結(jié)果按式(1)計算，計算結(jié)果表示到小數(shù)點后兩位。

W=c.V/1000m*100 (1)

式中:

W——化妝品中曲酸的含量，%；

c——從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上查出的試樣溶液中曲酸的濃度，單位為毫克每升(mg/L)；

V——試樣溶液定容體積，單位為升(L)；

m——試樣的質(zhì)量的數(shù)值，單位為克(g)。

7 回收率和測定低限

7.1 回收率的實驗數(shù)據(jù)

曲酸濃度在0.02%~3.00%范圍，回收率在98.50%~116.4%之間。

7.2 測定低限

本方法對曲酸的測定低限為0.005%。

8 精密度

曲酸含量在0.02%，測定結(jié)果(n=6)間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.28%；

曲酸含量在0.50%，測定結(jié)果(n=6)間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.14%；

曲酸含量在1.00%，測定結(jié)果(n=6)間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.58%；

曲酸含量在2.00%，測定結(jié)果(n=6)間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.10‰。

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